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细胞污染的原因:九个大意犯错

一、穿戴一时爽,细胞白培养


实验室使用规则都会有自己的条例,但难免会出现我行我素之人,不换鞋?不戴口罩?不戴帽子?这不是等着细菌钻空子呢。


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二、紫外和酒精,乱用也不灵


面对实验室细胞培养你可能是高手,但是能让它不污染,是要有很多注意事项的。紫外线和酒精能灭菌吗?答案是:可以。但你要问我紫外线和酒精能杀死全部细菌吗?当然不能。同样的灭菌方式用的方式也有很多的讲究的。例如:超净台为什么尽量要用酒精棉球而不是用酒精喷壶呢?因为用酒精棉球的话,可以在灭菌的同时把菌体从手上撸下去。而喷壶只能短暂灭菌而已,所以要多用棉球,少用喷壶。



三、生物安全柜,别超三八线


实验室的生物安全柜的玻璃窗是有警戒线的,若超过这个警戒线,生物安全柜的风帘就几乎丧失了作用,而且会引入室内空气中的真菌。



四、拿瓶不拿盖,拿盖污染快


我们在进行细胞培养时,会用到很多种容器,但当用细胞培养瓶进行培养时,最最忌讳的是拿到瓶子时因为习惯问题会直接拿瓶盖那一端,看似正常的一个操作,其实暗藏细胞污染大隐患。



五、门前堆得多,霉菌找到窝


生物安全柜操作时最应该注意的是整洁度,很多实验人员为了使用方便,往往把需要用的材料堆得整个门前全是,这样不仅会堵住出风口,还会导致动作不流畅,气流扰乱,影响实验结果。



六、清洁水浴锅,否则杂菌多


水浴锅一般是比较容易被忽视的,当你进行细胞复苏时,37℃对于真菌和细菌来说可是个好的生存环境呢。复苏完毕,冻存管湿漉漉的状态下即使再用酒精消毒也没什么意义了。清洁水浴锅:

1、定期清洁

2、加抑菌剂,(不是加双抗,加2%的硫酸铜),可不要以为披上了保护伞就没有细菌来了,硫酸铜对水浴锅有腐蚀性,因此也要定期更换清洁。

切记:定期清洁、定期更换;定期清洁、定期更换;定期清洁、定期更换;   

重要的事情说三遍!!!



七、水盘要污染,一箱全崩盘


和水浴锅称为联谊兄弟的培养箱的水盘,一个坐拥37℃温床的水环境,很多水盘由于不按时清洗,会出现霉斑,也就是孢子。这家伙可厉害了,一污染,你那一箱子还用想吗?因此通常情况下我们要定期清洗:

1、培养箱:用0.1%的新洁尔灭或者84清洗(交替使用,防止微生物耐药);

2、水盘:加入饱和的磷酸氢二钠可以有效预防细菌真菌,但是需要定期加入去离子水防止析出。



八、灭菌灭不好,污染随时找


细胞房所使用的枪头,必须要经过湿热灭菌。

1、用报纸包好是因为灭菌锅一般在细胞房外面,所以要保证内部枪头盒结晶。

2、烤干是为了防止内部有水分,当你开启枪头盒后,有水的地方更容易被霉菌的孢子所接触附着,也就更容易污染。



九、暴力移液器,污染洒满地


很多人在进行实验时往往会漏掉很多细节,比如:用移液器时暴力吸液,稍微一不小心必然会把培养基或者细胞沾到移液器的口上。因此需要谨慎谨慎再谨慎。使用过后用75%的乙醇,或者5%的硫酸铜,或者0.1%的新洁尔灭来擦一下的,这样可以有效防止一些污染。


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