很多老师培养MCF-7过程中出现细胞生长慢、复苏贴壁率低、等情况，这期就给大家解剖mcf-7的小细节，快来了解吧!

人乳腺癌细胞MCF7保留了分化乳腺上皮的许多特性。包括：能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成圆形复合物（domes）。该细胞含有WNT7B癌基因。肿瘤坏死因子α（TNF alpha）可以压制MCF-7细胞生长。细胞经抗雌激素处理后能调节胰岛素样生长因子结合蛋白IGFBPS分泌。

中乔新舟培养体系

MEM（含NEAA）（中乔新舟  货号：ZQ-300）+10%胎牛血清（中乔新舟  货号：AU0600）+1%双抗（中乔新舟   货号：CSP006）+1%L-alanyl-L-glutamine（中乔新舟  货号：CSP004）+1%SP（中乔新舟  货号：CSP003）+0.01%human recombinant insulin（中乔新舟   货号：CSP001-10）

1. 胰岛素是由胰岛β细胞分泌的一种多肽激素。胰岛素是无血清哺乳动物细胞培养基中的普遍添加物质；

2. 在许多细胞活动中发挥重要作用：如促进糖和氨基酸转运，提高合成代谢降低分解代谢，刺激细胞生长等等。重组人胰岛素为重组技术生产的由51个氨基酸残基组成的多肽;

3. 培养时，人胰岛素可以代替牛胰岛素；

4. 中乔新舟的胰岛素为白色或类白色结晶性粉末，在水、乙醇和乙醚中几乎不溶，在稀盐酸和稀氢氧化钠溶液中易溶。本产品用10mM盐酸溶液溶解制成10mg/ml的浓缩液，经0.22μm过滤除菌，可作为哺乳动物贴壁细胞或悬浮细胞培养添加剂，使用时请根据细胞培养要求添加。

MCF-7特点

倍增时间：1.8天（PubMed=9671407）；80小时（PubMed=25984343）；31.2小时（PubMed=22628656）；25.3小时（PubMed=24389870）；25.4小时（NCI-DTP）~50小时，范围为30-72小时（DSMZ）~38小时（PBCF）；

成团簇的形式生长：

由于mcf-7细胞是三维团簇的方式生长，复苏和传代后会重新附着为三维岛（会有一些不会重新附着的簇）。生长最终会从岛屿状慢慢扩散开来，随着时间的推移，细胞会缓慢变成单层，这个时候细胞基本处于对数生长期。

生长缓慢：

倍增时间：1.8天（PubMed=9671407）；80小时（PubMed=25984343）；31.2小时（PubMed=22628656）；25.3小时（PubMed=24389870）；25.4小时（NCI-DTP）~50小时，范围为30-72小时（DSMZ）~38小时（PBCF）。

传代比例：

MCF-7是一种本身生长缓慢的细胞，当细胞培养至细胞 70-80% 的汇合度，即可进行分瓶处理，一般T25培养瓶建议1:2传代，每周可传代一次，如果细胞生长速度比正常的时候更慢，可以适当提高血清到20%有利于促进生长。

贴壁率低：

该细胞在复苏、传代后，细胞会有一些漂浮状态，这些漂浮细胞是正常现象，可以视为混合的贴壁和悬浮细胞系。一般复苏、传代培养3天后漂浮细胞会再继续粘附贴壁。直到生长从岛屿扩散开来并且在培养瓶内伸展开，通常在进行换液的时候我们会补加培养基，如果一定要全换液，可以通过离心收集悬浮细胞以1000转5min,并将悬浮细胞接种到新培养瓶。

密度依耐性：

Mcf-7细胞密度低时，生长缓慢，接种密度建议启动接种密度：8.0 x 10 4至 1.5 x 10 5活细胞/cm 2为宜；继代培养的接种密度：4.0 x 10 4 至 1.0 x 10 5 活细胞/cm 2。

收货后处理技巧

冻存管MCF-7：

收到货后确保泡沫箱是否有干冰，若无干冰及时拍照并反馈中乔新舟销售或技术；

如果细胞不急用可放入-80冰箱一周，长期保持请放入液氮哦；

复苏建议离心去除冻存液，快速加入提前准加入培养液的复苏瓶；

显微镜下观察细胞亮度及密度，必要时可进行取样了解存活率；

放入培养箱后2-3天再次观察，如果漂浮细胞属于正常情况，请耐性等待。

复苏瓶MCF-7：

收到货后喷放入培养箱静止2-4小时；

显微镜下观察细胞状态并进行拍照；

细胞几乎都贴壁的情况下进行传代处理；

消化过程中加入胰酶手掌心拍打瓶尾部，细胞成片脱落后，可稍微延长30s-60s，至细胞呈现单个细胞即可终止。

实验高分文章

1.MCF-7 cells（货号：ZQ0071，影响因子:14.919）。

Bacteria eat nanoprobes for aggregation-enhanced imaging and killing diverse microorganisms

原文链接：

https://www.nature.com/articles/s41467-022-28920-6

2.MCF-7 cells（货号：ZQ0071，影响因子:11.78）。

A metabolic acidity-activatable calcium phosphate probe with fluorescence signal amplification capabilities for non-invasive imaging of tumor malignancy

原文链接：

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095927321006952