支原体(mycoplasma):支原体是一种大小仅为0.2~0.3 um,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45um)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。因此细胞都需要定期(如每个月)进行支原体污染的检测。对于大多数细胞系来说,是可以通过不影响细胞特性的前提下清除细胞内的支原体污染。
编号 1 |
名称 支原体清除液A |
体积 0.5 ml |
2 |
支原体清除液B |
0.5 ml |
频繁使用时,建议保存在4℃,长期保存时建议保存在-20℃。注意:避免多次反复冻融。有效期为收到该产品之日后在4℃条件下保存6个月,-20℃条件下可保存1年以上。
通过支原体检测试剂盒检测证实为支原体污染的细胞,通过以下步骤可以在不影响细胞生长特性的前提下清除细胞内污染的支原体。
a) 弃去培养皿或培养瓶中的细胞培养液。
b) 加入新鲜的细胞培养液,同时按照1:200的比例加入支原体清除液A(5μl 支原体清除液A加入到1ml培养液中)。
c)2天之后更换含有支原体清除液A的培养液1次。
d)经过支原体清除液A处理4天后,更换为含有1:200的支原体清除液B的细胞培养液(5μl 支原体清除液B加入到1ml培养液中)。
e)两天之后更换含有支原体清除液B的培养液1次。
f)重复以上支原体清除液A和B的处理方法一次后,即可完全清除支原体的污染,可通过支原体检测试剂盒检测支原体清除情况。