支原体PCR检测试剂盒描述:
支原体是很小和自我复制的原核生物,是原代和连续细胞系培养物的常见污染物。已经表明,微囊藻污染影响细胞生长,形态和代谢。由于其尺寸小和柔韧性,支原体可以通过0.2μm的常用过滤器。此外,与细菌和真菌不同,微囊菌污染对常用抗生素具有抗性,并且不容易在视觉上被发现。这些缺点强调需要定期筛查以控制支原体污染。常规筛选方法包括微生物培养,荧光DNA染色和生化检测方法。然而,支原体培养限于专门的实验室,需要2-4周。由于存在破碎的细胞核,DNA荧光染色的结果难以解释。各种生化检测耗时且通常缺乏灵敏度。近来,基于聚合酶链反应(PCR)的方法已被开发为快速方便地检测低水平支原体感染,由于其优异的灵敏度和特异性,其提供了优于常规方法的巨大优势。
支原体16S rRNA序列的计算机比对研究揭示了高度保守序列的存在。根据这些序列设计的引物允许支原体DNA片段的特异性扩增,从而高度灵敏地检测支原体。ScienCell™ 支原体PCR检测试剂盒是基于16S rRNA的PCR测定,包括2X反应缓冲液,引物组,以及内部扩增对照(IAC)和阳性样品对照。我们选择的属特异性引物组识别出占污染98%的五种典型污染支原体物种(即M.hyorhinis,M。arginini,M。orale,M。fermentans和A.laidlawi),以及Ureaplasma,Spiroplasma和Acholeplasma属的成员,它们占污染的剩余2%。该试剂盒不扩增真核和细菌DNA。IAC被设计为通过同一组引物与目标支原体序列同时共扩增。得到的对照条带通过分子量的差异与靶条带区分开,表明DNA扩增的发生。因此,可以鉴定由于在一些细胞培养物中存在PCR抑制剂而导致的假阴性结果。我们的试剂盒还提供阳性样品对照,它是发酵乳杆菌的非感染性基因组DNA(gDNA)。另一方面,无模板(即无DNA的DI H 2 O)阴性样品对照可以帮助确定由于残留污染是否存在假阳性结果。每个实验应包括阳性和阴性样品对照,以及IAC。
产品使用说明:仅供科研研究使用
货号 |
8208 |
产地 |
美国 |
缩写 |
MYCO |
规格 |
100 tests |
用途 |
科研 |
保存 |
-20°C |
运输 |
干冰 |
Answers:
Posted by Manoj Sharma on Wednesday, January 27, 2016
Hi Teisha,
1.) mTeSR should not have PCR inhibitors.
2.) The shelf life of the kit is 3 months since one of the components is a long linear DNA which is not very stable during freeze/thaw.货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 指令 |
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