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细胞又污染了,这几点快重视起来吧!
问题一:单细菌污染



对策:1、检查操作人员的无菌操作技术
检查相关培养基与试剂是否为操作者个人专用
检查操作者的清洁情况:
培养操作前后是否洗手;
是否更换实验服;
是否扎好头发;
进行细胞培养时是否严格按照无菌要求佩戴实验服具(包括实验服、
口罩、防尘帽、手套等);
5、若污染反复出现,问题往往出自使用试剂,需立即进行检查。


问题二:支原体污染
对策:1、与其他操作者一起检查支原体污染,确认筛选步骤是否具有可操作性;
确认使用的血清是否为严格过滤,确保其质量;
外来细胞系是支原体感染的主要来源,核实细胞支原体检测结果;
若细胞被支原体污染,终止实验,重新复苏未被污染的细胞株,并规范操作;若细胞比较珍贵或者为种子细胞,无法丢弃,则建议选用特异性的支原体杀除剂进行污染清除,保护细胞;
工作区域是否按照标准且定期清理消毒;
原代培养与重要实验中应严格限制抗生素的过度使用
问题三:多种微生物污染
对策:1、确认是否严格遵守所有的规范程序,排查操作过程的疏漏点
2、检查实验服是否清洁,以及穿戴是否扣紧,操作时可能会干扰洁净台的空气层流;
3、检查公共洁净台通风系统、过滤系统是否有破损,及时进行维修;
4、检查操作台是否整洁,台面物品的摆放是否影响操作,有引起污染的可能,及时进行整理,操作过程中所有的溢出物应立即清洁干净;
5、检查使用的试剂,是否使用未灭菌的试剂,或者使用期间是否被污染;


针对多位实验者共有的问题
问题一:单细菌污染
对策:1、检查不常使用的某种试剂或培养基是否被污染?
2、检査培养箱是否被污染?如果是,及时清理干净。
3、检査空气中是否微生物孢子体增多?可通过实验间歇期放置细菌检测平皿加以检查。
4、检查公用试剂的使用频率,减少由于使用公用试剂而引起污染的几率。
5、检查洁净台是否污染?用75 %的乙醇、酚类消毒剂擦拭工作区域表
面和工作台上摆放的物品。
6、检査过滤器是否密闭完好或者是否脏腻阻塞,检査其他的管道部分
是否有渗漏或者污染,及时进行清洁与修缮。



问题二:多种微生物污染


对策:1、检查是不是消毒过程出现问题?
  (a)检査高压灭菌锅和高温烤箱是否有电路和机械故障。
(b)检査高温烤箱中待消毒的物品是否塞得太满,阻碍了空气充分流动。
门密闭是否不严或有漏孔,以及灭菌过程的温度和时间是否有误
(c)检査高压灭菌锅内待消毒的物品是否塞得太满,使蒸汽不能充分环流,确认所有的排汽管道畅通。
2、检查新员工未按标准规程操作?监督新员工的操作培训。
3、检查是否储存过程中发生污染?对存储设备及时清理,确认已高压灭菌的物品密封完好,并检查存放的液体有无倒置。
4、控制抗生素使用量,防止细菌的耐药性增强。
5、检查培养室内空气是否受到污染,可利用培养工作的间歇期,在保持通风状态下,将敞口的血琼脂平皿放置于操作间中,以判断室内空气是否受到污染的情况。
      6、检査洁净台、室内供气和空调系统是否正常,如有问题,及时进行修理,还有新购设备洁净程度也需要进行检查。
7、如果培养室附近有施工场所或其他因素干扰,应尽量改善培养室的隔离状况(如经常关门、增设屏风、张贴非培养室人员免人告示、清洁所有进入无菌操作间的仪器和物品等)。

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