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hiPS 人诱导多能干细胞
hiPS 人诱导多能干细胞(货号;DF-GMP-ZB11AP-I)技术是指通过导入特定的转录因 子将终末分化的体细胞重编程为多能性干细胞。iPS 细胞的出现，在干细胞研究领域、表观遗传学 研究领域以及生物医学研究领域都引起了强烈的反响。 采用仙台病毒介导的外源转录因子导入，将人脐带血单核细胞诱导成 iPS 细胞。 重编程转录因 子：OCT4、SOX2、KLF4、MYC 该细胞每管含有细胞数>5×10^5 cells/ml，此细胞通过免疫荧光染色验证，经测试不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
建议培养试剂：
培养基名称：mTeSR™1 basal Medium
货号：85851
品牌：STEMCELL 5X
补充剂名称：mTeSR™1 5Xsupplement
货号：85852
品牌：STEMCELL
包被液名称：Vitronectin (VTN-N)
货号：A14700
品牌：Gibco™
消化液名称：ReLeSR™
货号：05872
品牌：STEMCELL ROCK1
压制剂名称：Y27632
货号：72304
品牌：STEMCELL
稀释液：不含钙镁的 DPBS
温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳
安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，在二级生物安全台内操作，并请注意防护。
细胞复苏：
六孔板需事先包被好。 操作：包被液 Vitronectin (VTN-N)100X，根据用量用不含钙镁的 DPBS 稀释后每孔加 1-1.25ml 包被液，用封口膜封上，放 4 度冰箱过夜后使用。包被好的六孔板可以在 4 度冰箱存放 2 个星期， 用之前 37 度回温。
取一个细胞冻存管，一个细胞冻存管可以复苏两个孔。
准备 3 毫升的 medium，加入 1 毫升细胞冻存液，1500rpm，3 分钟。
准备复苏专用培养基：全培养基 6mL 中加入 10uM 的压制剂 Y27632（母液浓度为 10mM 时 1：1000 稀释）。
离心后去上清，加入复苏专用培养基 6ml，铺 3 个孔，次日换成不加压制剂 Y27632 的完全培养基。
每天换液：细胞密度比较稀的时候每孔换液 1.5ml，细胞密度较浓或培养基颜色变黄时，每孔换 液 2 毫升，细胞密度很浓时每孔换液 3 毫升，换液的时候吸旧培养基轻吹孔底 1-2 次，吸走旧的培 养基，加入新的培养基。
细胞传代：生长的细胞当克隆变得较大而与相邻的克隆开始融合时，这时可进行传代。 配置完全培养基：培养基和 5X 补充剂按照体积比 4:1 的量混合，RT 回温。 事先包被六孔板，操作：
包被液 Vitronectin (VTN-N)是 100X，根据用量用不含钙镁的 DPBS 稀释后每孔加 1-1.25ml 包被 液，用封口膜封上，放 4 度冰箱过夜后使用。包被好的六孔板可以在 4 度冰箱存放 2 个星期，用之 前 37 度回温。
吸掉完全 medium，加入 1ml/孔的 ReleS，RT，3 分钟。
准备包被孔，将包被液吸出，加入 1.5ml 新鲜完全培养基。
用从孔边缘吸掉 ReleS，细胞仍然成片，只是不贴附在孔底，加入 1ml 的完全培养基，吹匀吹散 细胞，吸取一定量的细胞液，按照一定稀释比例加入到新包被好的装有新鲜完全培养基的孔中。加 入细胞液后用枪立刻轻吹一次混匀，防止细胞局部密度过于大。 注：稀释比例根据传的代数而定。 初次传代 1:3，其次传代 1:6，再次传代 1:9，第 4 次传 代 1:12，第 5 次传代 1:15。
每天换液：细胞密度比较稀的时候每孔换液 1.5ml，细胞密度较浓时每孔换液 2 毫升，细胞密度 很浓时每孔换液 3 毫升，换液时吸旧培养基轻吹孔底 1-2 次，吸走旧培养基，加入新的培养基。
细胞冻存：
吸掉完全 medium，加入 1ml/孔的 ReleS，RT，3 分钟；
洗掉所有 ReleS，加入冻存液，吹匀后 1 毫升/冻存管，-80 度冷冻保存。
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