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MIN-6胰岛β细胞的理想替代

作为一种广泛使用的胰岛β细胞系,正以其独特的优势成为糖尿病机制研究、药物筛选及治疗开发的重要工具。今天,让我们一起揭开MIN6细胞培养的神秘面纱。

一、胰岛β细胞的理想替代

MIN6细胞是从转基因小鼠胰岛瘤中分离得到的一种永生化细胞系,保留了胰岛β细胞的许多关键特性,包括:

胰岛素分泌功能:MIN6细胞能够响应葡萄糖刺激,分泌胰岛素,是研究胰岛素分泌机制的理想模型。

稳定性:作为一种永生化细胞系,MIN6细胞可以在体外长期培养,避免了原代胰岛细胞寿命有限的问题。

易操作性:MIN6细胞易于传代和冻存,适合大规模实验和高通量筛选。

二、MIN6细胞的培养

培养基:DMEM (中乔新舟  货号:ZQ-100)+10%FBS(中乔新舟  货号:ZQ0500)+1%P/S(中乔新舟  货号:CSP006)。

细胞特性MIN-6细胞不规则、无细胞形态,贴壁性差,细胞成片状形成小岛屿,密度高后岛屿连接形成大片,该细胞汇合度达不到100%密度。

传代频率: T25瓶80%汇合度,1:2传代需要3-5天再次进行传代。

换液频率2-3次/周(T25瓶7ml完全培养基)。

 

(中乔新舟MIN-6细胞培养图 10X)

 

三、Min6培养注意的细节:

培养:细胞贴壁性不好,培养过程中会有漂浮的圆形细胞,属于正常现象。

传代:在消化过程中,当细胞成片脱落后,建议再室温延长消化2min,让团块分散开一些。

运输: 由于MIN-6细胞形态无规则性,贴壁性差,发货T25瓶到货后会出现一些不可控因素,可能会脱落,皱缩漂浮,如下到货细胞状态,应该怎么处理呢?下面由小编给大家汇总一下吧。

 

(我司客户到货T25复苏瓶MIN-6细胞图)

到货T25细胞处理步骤:

1. 到货发现有任何异常现象,污染、漏液、细胞漂浮等,请拍10X、 20X 各 2-3 张照片,并当天联系我司销售人员/区域代理或者我司技术人员。

2. 用 75%酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,满瓶培养基状态置于培养箱中静置培养2~4h 后进行操作。

3. 2-4小时后观察贴壁情况,若部分漂浮,需收集悬液,1200rpm/5min(约 250g 离心力)离心,收集漂浮细胞。

4. 瓶内贴壁细胞消化步骤:

l 培养基去除干净,用PBS轻轻洗涤细胞。(T25瓶3-5ML)

l 加入0.25%胰酶-EDTA溶液,37℃消化3-5分钟。手掌心拍打瓶尾部,显微镜下观察,细胞消化成流沙状成单个细胞脱落。

l 加入3-5ml完全培养基终止消化,轻轻吹打细胞至单细胞悬液,合并悬浮细胞。

l 按1:2的比例将细胞接种至新的培养瓶中。

5. 消化1:2传代后第二天细胞状态图:

 

   (MIN-6细胞1:2传第二天,图片由中乔客户提供)

6. 培养3天后细胞状态图,此时可再次进行传代分瓶。

 

(中乔新舟客户提供,手机拍摄)

7.若培养过程中或实验铺板漂浮细胞多,可用多聚赖氨酸处理细胞培养瓶或孔板,让细胞贴壁更牢固

四、选择MIN6细胞,开启糖尿病研究的新篇章!

如果您在培养MIN6细胞方面有任何问题,欢迎随时联系我们!我们将为您提供专业的技术支持和优质的产品服务,助您在糖尿病研究的道路上走得更远!

 

 

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上海中乔新舟生物科技有限公司
Shanghai Zhong Qiao Xin Zhou Biotechnology Co.,Ltd.
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