【细胞介绍】

THP-1是一种人急性单核细胞白血病细胞系，最初从一位1岁患有急性单核细胞白血病的男孩的外周血中分离出来的单核细胞。该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用，无表面和胞质免疫球蛋白。 可以用佛波醇 TPA诱导单核细胞分化。表达C3R和FcR；可作为转染宿主。也因其能够被诱导分化成单核/巨噬细胞，所以在免疫学研究中具有广泛的应用。例如：巨噬细胞分化与炎症模型、基因编辑研究、免疫调节作用研究、疾病模型构建与药物筛选、STING激动剂筛选模型、细胞凋亡和细胞周期研究、表观遗传调控研究等。这些应用展示了THP-1细胞系在免疫学研究中的多样性和重要性，为理解免疫调节和疾病机制提供了宝贵的工具。

细胞生长状态：THP-1细胞是悬浮生长并形成松散的团块，几乎没有细胞附着，细胞倍增时间为60-70h。

形态：在Wright-giemsa染色涂片中，即有圆形细胞也有一些多边形细胞，直径为12-14μM，细胞中有少量嗜碱性的胞浆，胞浆中含有少量嗜蓝颗粒和少量液泡，细胞核呈锯齿状，形状不规则。

中乔新舟拍摄的THP-1细胞拍摄的在不同放大倍数下的图片：见上图4X、10X、20X.

细胞名称：Thp-1人单核细胞白血病

细胞别称：THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1

产品货号：ZQ0086

生长特性：悬浮、低密度容易聚团，高密度分散

培养条件 ：RPMI-1640（中乔新舟货号：ZQ-200）+10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500）+1%双抗（中乔新舟货号：CSP006）+β-Mer 终浓度：0.05mM（中乔新舟货号：CSP005，例：500ml添加500ul）

完全培养基货号：ZM0086

见上图培养基图片。

【细胞传代】

该细胞为悬浮细胞。根据我司培养经验

A:当培养基颜色比较黄时，建议离心换液,细胞沉淀用手指弹松后添加完全培养基均匀移入两个新的 T25培养瓶中维续培养即可(1:2 传代)。

B:细胞数量多，液体不黄，建议使用【半换液法】添加一半新培养基并进行分瓶(1:2传）。

THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性，当细胞密度达到8×10⁵个活细胞/ mL时需要进行传代。细胞密度不要超过1×10⁶活细胞/ mL。比例一般为1:2-4，可以分瓶后补充培养液，不需要离心，t25培养瓶分瓶后补充新鲜完全培养基到7ml，

如果对悬浮细胞密度把控不好可以，最佳的方式是进行细胞计数。培养一周左右可以离心一次，以去除一些死细胞。

该细胞在培养过程中，可能会有少量贴壁或聚集成小团生长，属于正常情况。传代时可以轻轻打散，如少许细胞已贴壁则传代时丢弃，小团生长的细胞正常传代培养即可。

该细胞对细胞密度较为敏感，培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围。

该细胞较难复苏，复苏后需要约7天左右才可能恢复至正常状态。刚复苏后，细胞生长缓慢且会出现黑色细胞碎片，少量细胞碎片不影响细胞正常生长，待细胞恢复生长后用半换液法可以稀释碎片。

细胞冻存时务请提高细胞密度，建议1个T25培养瓶中含有3-5×10⁶细胞量时冻存一支。

该细胞对血清质量较为敏感，我司建议您使用优质胎牛血清进行培养或选择订购我司配套THP-1完全培养液。

【细胞冻存】

1、细胞密度80%以上，活细胞百分率达95%以上时，将细胞按照以上步骤进行消化收集细胞沉淀进行冻存。

2、细胞沉淀用适量通用含血清型程序冻存液（货号：CSP169）重悬， 建议一瓶T25细胞冻存一管（1ml/管），然后将分装好的细胞冻存管进行程序性降温冻存，冻存细胞降温程序（2-8℃，放置40min;-20℃,放置30min-60min,-80℃放置一天后转移至液氮保存）或使用程序降温盒降温后，再转至液氨罐中长期保存。

见上图冻存液图片。

【细胞复苏】

THP-1细胞复苏后通常需要3-5天恢复状态，细胞对密度有一定依赖性，如果复苏时离心去除了冻存液，建议复苏后48小时内不要进行操作。密度低时细胞会抱团生长属于细胞快速增殖生长的一个阶段，是正常情况。

冻管细胞复苏：

1、液氮取出的细胞放入干冰中转移至细胞房，提前准备好完全培养基，离心管等试剂和耗材。

2、冻管细胞在37°C水浴中迅速解冻（大约1-2分钟）。为了减少污染的可能性，保持冻管瓶盖在水浴液面之上。 一旦大部分内容物解冻，立即将冻管移出水浴，70%的乙醇消毒冻管外壁。

3、将内容物转移到含3-6mL完全培养基的离心管中，轻轻混匀，离心（125 g，3～5分钟）1000-1200rmp去除培养基， 管底细胞沉淀用手指弹松，再添加3ml完全培养基至离心管内混匀细胞并进行计数。

4、用适量完全培养基将细胞密度调整至0.6-2.0X10⁵，转移至培养瓶中，再将瓶转移至培养箱中静置培养。T25培养瓶建议添加5-7ml完全培养基。当密度达到80%以上时传代。

【常见问题】

1. THP-1细胞培养过程中贴壁问题？

1）THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况，THP-1细胞被发现自发贴壁，可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞；

2）当贴壁细胞比例高于20%，建议排查细胞生长培养箱温度及CO₂浓度、培养基成分（营养体系的酸碱性）、以及培养瓶可用非TC处理过的培养瓶，不利于细胞贴壁；

3）更换血清可能会导致THP-1细胞很容易分化成为巨噬细胞。

2. THP-1细胞在培养过程中的聚团问题？

1）THP-1细胞在密度较稀时，有少量细胞聚团属于正常现象，不建议将聚团的细胞吹散，等细胞密度增高时，细胞会自然分散开；

2）细胞密度高时，聚团细胞比例高于30%时，并且细胞团呈糜烂状，细胞之间界限不清，胞体质膜有溃烂感，这种情况下的细胞聚团是异常的，建议排查营养体系的酸碱性、培养箱环境问题、更换血清品牌或增大血清比例（不超过20%）有助于解决聚团问题。

3.THP-1复苏不起来怎么办？

1）THP-1细胞对冻存条件比较敏感，复苏存活率受冻存体系、冻存和复苏流程影响比较大。该细胞冻存后复苏率较低，冻存时请酌情提高细胞量，冻存时活细胞密度不能低于100万-300万/mL，同时复苏密度也有依赖性，细胞复苏后需要培养3-5天状态才能恢复，如有细胞碎片，待细胞密度增大后通过低速离心去除。

2）该细胞为悬浮细胞，在培养时更喜欢温和处理，细胞密度低时，培养时尽量少对细胞进行离心处理以此造成对细胞的伤害。换液时不要全培养基更换。

3 ）THP-1细胞中需要添加β-巯基乙醇，现用现配，不可直接添加至完培中长期储存，会影响β-巯基乙醇的稳定性。

4. 培养基里一定要加β-巯基乙醇（ β-mercaptoethanol）吗？

β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂，有抗氧化的作用，可减少氧化应激对THP-1细胞的影响；当细胞密度过大但需要维持细胞状态时，可适当增加β-巯基乙醇的比例（不超过标准量的1.5倍）。

【注意事项】

1.该细胞为悬浮细胞。根据我司培养经验A:当培养基颜色比较黄时，建议离心换液,细胞沉淀用手指弹松后添加完全培养基均匀移入两个新的 T25培养瓶中维续培养即可(1:2 传代)。B:细胞数量多，液体不黄，建议使用【半换液法】添加一半新培养基并进行分瓶(1:2传）。

2. 该细胞在培养过程中，可能会有少量贴壁或聚集成小团生长，属于正常情况。传代时可以轻轻打散，如少许细胞已贴壁则传代时丢弃，小团生长的细胞正常传代培养即可。

3. 该细胞对细胞密度较为敏感，培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围。

4.  该细胞较难复苏，复苏后需要约7天左右才可能恢复至正常状态。刚复苏后，细胞生长缓慢且会出现黑色细胞碎片，少量细胞碎片不影响细胞正常生长，待细胞恢复生长后用半换液法可以稀释碎片。

5. 细胞冻存时务请提高细胞密度，建议1个T25培养瓶中含有3-5×10⁶细胞量时冻存一支。

6. 该细胞对血清质量较为敏感，我司建议您使用优质胎牛血清进行培养或选择订购我司配套THP-1完全培养液。

【发表过的文献】

截至到2024年，引用中乔新舟该细胞发表过的文献总数42篇，总的影响因子228.79，最高影响因子33.50.

下面列举了几篇代表性的文献，可以参考：