支原体PCR检测试剂盒描述：

       支原体是很小和自我复制的原核生物，是原代和连续细胞系培养物的常见污染物。已经表明，微囊藻污染影响细胞生长，形态和代谢。由于其尺寸小和柔韧性，支原体可以通过0.2μm的常用过滤器。此外，与细菌和真菌不同，微囊菌污染对常用抗生素具有抗性，并且不容易在视觉上被发现。这些缺点强调需要定期筛查以控制支原体污染。常规筛选方法包括微生物培养，荧光DNA染色和生化检测方法。然而，支原体培养限于专门的实验室，需要2-4周。由于存在破碎的细胞核，DNA荧光染色的结果难以解释。各种生化检测耗时且通常缺乏灵敏度。近来，基于聚合酶链反应（PCR）的方法已被开发为快速方便地检测低水平支原体感染，由于其优异的灵敏度和特异性，其提供了优于常规方法的巨大优势。

        支原体16S rRNA序列的计算机比对研究揭示了高度保守序列的存在。根据这些序列设计的引物允许支原体DNA片段的特异性扩增，从而高度灵敏地检测支原体。ScienCell™ 支原体PCR检测试剂盒是基于16S rRNA的PCR测定，包括2X反应缓冲液，引物组，以及内部扩增对照（IAC）和阳性样品对照。我们选择的属特异性引物组识别出占污染98%的五种典型污染支原体物种（即M.hyorhinis，M。arginini，M。orale，M。fermentans和A.laidlawi），以及Ureaplasma，Spiroplasma和Acholeplasma属的成员，它们占污染的剩余2%。该试剂盒不扩增真核和细菌DNA。IAC被设计为通过同一组引物与目标支原体序列同时共扩增。得到的对照条带通过分子量的差异与靶条带区分开，表明DNA扩增的发生。因此，可以鉴定由于在一些细胞培养物中存在PCR抑制剂而导致的假阴性结果。我们的试剂盒还提供阳性样品对照，它是发酵乳杆菌的非感染性基因组DNA（gDNA）。另一方面，无模板（即无DNA的DI H 2 O）阴性样品对照可以帮助确定由于残留污染是否存在假阳性结果。每个实验应包括阳性和阴性样品对照，以及IAC。

产品使用说明：仅供科研研究使用

Answers:

       Posted by Manoj Sharma on Wednesday, January 27, 2016

Hi Teisha,

       1.) mTeSR should not have PCR inhibitors.