一.试剂盒说明
支原体(mycoplasma):支原体是一种大小仅为0.2~0.3 um,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。因此细胞都需要定期(如每个月)进行支原体污染的检测。检测支原体的方法包括肉汤或琼脂培养、 ELISA、直接或间接的荧光染色、PCR法等,其中, PCR法灵敏度最高(可检测10个拷贝DNA)。本试剂盒能检测支原体种类包括 M. Arginini, A.laidlawii, M.Orale, M. Hyorhinis, M. Fermentans,等多种常见支原体,在细胞污染中这些种支原体占到99%以上的比例。本产品克服了PCR反应配置过程中的繁琐程序,通过加入抑制非特异性结合的cocktail,有效的整合了所有PCR反应成分,实现了一步法PCR技术新的突破。
二.试剂盒组份
组份
规格
储存条件
Myco-PCR-Mix
1 ml
4 ℃ / -20℃
Positive control
100 μl
4℃
Negative control
100 ul
4℃
三. 操作步骤
反应体系: Myco-PCR-Mix 18ul
待检测细胞上清液 2ul
按照以上反应比例,在PCR管中将待检测样品上清液 2ul加入到18ul Myco-PCR-Mix中,每次检测请用Positivecontrol模版作为阳性对照,用Negative control模版作为阴性对照。PCR反应程序为:95℃ 5min,(95℃ 30s,55℃ 45s,72℃ 45s)36 个循环,72℃ 5min, 10℃ 保存。PCR产物跑1.5 % 琼脂胶,用DL2000的DNA Marker显示片段大小。待检测样品中如果出现与阳性对照大小一致(450-600 bp)的条带,说明样品被支原体感染。
产品仅供使用说明:仅供科研使用。
货号 |
ZQ505-K |
产地 | 中国 |
缩写 |
Myco-PCR-Mix |
规格 |
1ml/50T |
用途 | 科研 |
运输 | 常温 |
保存 |
4℃冰箱 |
产品名称 | 价格 | 指令 |
支原体清除试剂盒 | ¥600.00 | 购物车 》 |
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